环境工程微生物学实验指导.doc
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实验一光学显微镜的操作及细菌、放线菌和 蓝细菌个体形态的观察 Ⅰ、显微镜的使用
一、实验原理 微生物学研究用的显微镜通常有低倍物镜(16mm,10)高倍物镜(4mm,40- 45)和油镜(1.8mm,95- 100)三种。
油镜常标有黑圈或红圈,它是三者中放大倍数最大的。
使用油镜时,油镜与其他物镜的不同是载玻片与接物镜之间,不是隔一层空 气,而是隔一层油质,称为油浸系。
这种油常选用香柏油,因香柏油的折射率n= 1.52,与玻璃基本相同。
当光线通过载玻片后, 可直接通过香柏油进入物镜 而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气,则称为干燥系;当光线通过 玻片后,受到折射发生散射现象,进入物镜的光线显然减少,这样视野的照明度 就减低了(图Ⅰ-1)。
利用油镜不但能增加照明度;更主要的是能增加数值口径。
因为显微镜的放大效 能由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径,即光线投射到物镜上的最大角度(称镜 口角)的一半正弦,乘上玻片与物镜间介质折射率所得的乘积,可用下列公式表 示: N A nsin 2 式中N A 数值孔径 n 介质折射率 最大入射角,即镜口角 数值孔径的大小又是衡量一台显微镜分辨力强弱的依据;分辨力是指显微镜 能辨别物体两点间最小距离的能力。
能辨别两点间最小距离 88
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闹钟
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