离体蛙心灌流.doc

离体蛙心灌流 ，该实验通过维持离体蛙心脏循环,观察不同的阳离子 (Na+、K+、Ca2+);酸、碱及肾上腺素,乙酰胆碱等神经递质对心脏活动的影响。
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实验一离体蛙心灌流（八木氏）
一、目的 在维持离体心脏循环的条件下，观察不同的阳离子 （Na+、K+、Ca2+）；酸、碱及肾上腺素，乙酰胆碱等神经递质对心 脏活动的影响，同时记录心输出量与心率的变化。

二、原理 心脏离体后，如用人工灌流法保持其新陈代谢的顺利进 行，则心脏仍能有节律地自动收缩和舒张，且可维持较长的 时间。
离体心脏活动所需的灌流液。
应同动物内环境一致改 变灌流液的成分，则可引起心脏活动的改变。

三、实验用品 蛙（蟾蜍）、蛙心夹、蛙板、蛙心套管、常规手术器械（蛙）、试 管夹、双凹夹、铁支架、小烧杯、滴管、张力换能器。
D- 95生理记录系统、任氏液、5%NaCl、l%KCl、1%CaCl
2、0.01%肾 上腺素、0.01%乙酰胆碱、3%乳酸、2.5%NaHCO
3、滴管、棉球、 棉线等。

四、方法与步骤 （一）离体蛙心的制备
1、暴露心脏 取青蛙（或蟾蜍）一只，用蛙针从枕骨大孔插入破坏延髓 后，仰卧固定于蛙板上，依次剪开胸前区皮肤和肌肉。
开胸暴 露心脏。
然后用镊子提起心包膜，再用虹膜剪刀将其剪破，使 心脏完全暴露出来。

2、蛙心插管 用蛙心夹在心舒张期夹住心室尖。
将心脏轻轻提起，辨 认与心脏相连的诸血管。
出入蛙心脏的血管共有九条（左主 动脉、右主动脉、左、右前腔静脉、后腔静脉，左、右肺静脉， 左、右肝静脉）然后将蛙心夹之连线用胶泥（或胶布）固定在蛙板上，以便操作。
用虹膜剪将连在左肝静脉上的心包膜剪 去（注意：不要损伤静脉窦）。
用镊子将已浸湿任氏液的一条 线穿过左肝静脉的下方，用另一条线穿过左主动脉下面，尽 量向远端结扎，并结扎除左主动脉及左肝静脉外的全部血管 。
左主动脉做输出管（动脉插管）。
左肝静脉做输入管（静脉管 ）插管。
首先用小镊子提起左肝静脉，用虹膜剪刀朝向心端剪一 “V”型切口，把盛有任氏液的蛙心静