康乃馨组培.doc

康乃馨组培 ，细胞工程。
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康乃馨植物组织培养
一、实验目的 掌握植物离体快速繁育原理、方法和完整过程。

二、实验原理 香石竹（学名：Dianthus caryophyllus）又名康乃馨,花色艳丽,开花时间长,装饰效果好,是世界上最 畅销的切花之一,具有较高经济价值。
由于病毒病侵害,常使植株矮化,花朵变 小,花色产生斑点,退色甚至不开花,影响切花产量和质量。
通过茎尖分生组织 培养,能够获得“无病毒”的健康植株,对于引进的少而新的脱毒种苗,再进行一 次茎尖培养,进一步降低基础苗中的病毒含量,并通过组织培养的方法快速繁 殖,在短期内,就可以获得大量的脱毒试管苗,使引入材料迅速在生产上推广 应用,取得明显的经济效益。

三、实验仪器与材料 仪器：超净工作台、酒精灯、电炉、烧杯、玻璃棒、镊子、解剖刀、不锈钢碟子、 纱布、记号笔、标签纸 试剂：75%乙醇、0.1%升汞、无菌水、MS培养基、 IAA0.1mg/L、BA 0.5mg/L、pH5.8-6.0、蔗糖、琼脂
四、实验步骤 培养基的配方
1、香石竹的生芽培养基MS+IAA(0.1mg/L)+BA( 2.0mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖（30g/L）+琼脂(8g/L)，pH5.8- 6.0,配制0.3L,用小培养瓶分装10~15瓶。
另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3~4瓶，，纱布、碟子若干，后二 者分别用报纸包好一同灭菌。

2、香石竹的继代培养基 MS+BA(0.3mg/L)+NAA(0.2mg/L)+蔗糖（30g/L）+琼脂(8g/L),pH5.8- 6.0,配制0.3L,用小培养瓶分装10-15瓶。
另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3- 4瓶，，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。

3、香石竹的生根培养基 MS+生根培养基为1/2MS+NAA(0.075mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(8g/L)，pH5.8- 6.0,配制0.3L,用小培养瓶分装10-15瓶。
另外，需要制备无菌水20瓶（大培养瓶），每人3- 4瓶，纱布、碟子若干，后二者分别用报纸包好一同灭菌。
香石竹的生芽培养
1、无菌操作准备 88