第17卷第4期 分析科学学报
.17 No.4 JOURNALOFANALYTICALSCIENCEVol2001年8月Aug. 2001文章编号:100626144(2001)0420346206
生物分析中近红外荧光探针进展
刘 欣 王 红 张华山
(武汉大学化学系,武汉,430072)
口摘 要:本文评述了10余年来方酸菁类、花菁类、噻嗪类、恶嗪类、罗丹明类、
BODIPY及酞菁等近红外荧光探针的发展。按其种类分别讨论了试剂结构与性能之
间的关系,并介绍了它们在生物分析中的某些应用。引用文献42篇。
关键词:近红外荧光探针;生物分析;衍生
中图分类号:O657.39 文献标识码:A
荧光光谱检测方法由于其灵敏度高、选择性好,在分析化学,特别是生物分析中有较广泛的应用。大多数生物分子本身无荧光或荧光较弱,检测灵敏度较低,为使之高灵敏地检出,人们用强荧光(Fluorescent)的标记试剂或荧光生成(Fluoregenic)试剂与待测物进行标记或衍生,生成具有高荧光强度的共价或非共价结合的物质,使检出限大大降低。目前用于标记或衍生的荧光试剂主要有荧光素类、罗丹明类、邻苯二甲醛(OPA)类等化合物,它们本身或衍生产物具有很高的荧光量子产率,但最大吸收波长和荧光发射波长多小于600nm。而对生物样品而言,其样品基体和一些杂质在此区域也会有吸收或荧光,再加上光散射的影响往往会产生较为严重的背景干扰,限制了荧光分析法灵敏度的提高[1,2]。
相对于常规荧光(Κem<600nm)检测而言,在近红外荧光(Κem>600nm)光区,生物样品基体光吸收或荧光强度很小,因而背景干扰大大降低,并且由于散射光强度与波长的四次方成反比,随波长的增加,拉曼散射迅速减小,使散射干扰也大为减少。特别是近年来,以结构紧凑、稳定性好、价格低廉的二极管激光器为基础发展起来的近红外荧光标记试剂及检测技术具有更高的灵敏度,已用于近红外荧光免疫分析、流动式细胞光度法、高效毛细管电泳分离中荧光检测生物活性物质等方面。同时,随着许多激光荧光、传感器、免疫检测装置的建立[3],近红外荧光染料显示出在生物分析中显示出优越性。下面就目前生物分子近红外荧光探针的种类及其应用进行评述。
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方酸菁类方酸菁染料是由方酸或其酯与富电子基团发生缩合反应而得1,32二取代衍生物,取代衍生物通常是吡咯、吲哚、苯胺等基团。方酸菁上存在的方酸环残基使其最大吸收波长和发射波长向长波方向移动,并可增加其富电子性,稳定方酸菁结构。对称性方酸菁的代表性结构1[4-6]
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